Disputatsforsvar ved Malene Møller Jørgensen
Ekstracellulære vesikler (EV’er) er membranafgrænsede nanopartikler, som udskilles af alle celler. De indeholder biomolekylært materiale, der afspejler deres cellulære oprindelse, og kan formidle signaler til fjerne celler. Dermed udgør de et lovende grundlag for både biomarkørudvikling og nye terapeutiske strategier.
Historisk set har analysen af EV’er været forbundet med betydelige metodiske udfordringer.
I 2011 blev EV’er primært analyseret ved hjælp af immunblotting eller flowcytometri, metoder der krævede store mængder protein (10–30 mg) samt omfattende isoleringsprocedurer. Disse begrænsninger hæmmede mulighederne for bredere anvendelse.
I 2013 introducerede MMM og hendes forskerkollegaer anvendelsen af proteinmikroarrays til at opfange og karakterisere EV’er ud fra blot 10 µL plasma eller cellekultursupernatant. Denne teknologi muliggjorde hurtig, simultan og sensitiv detektion af mange proteiner med minimal prøveanvendelse. Allerede i 2015 blev platformen udvidet til 60 antigener, hvilket markant øgede både følsomhed og kapacitet.
Med henblik på at bringe teknologien tættere på klinisk anvendelse blev glasslides efterfølgende erstattet af et 96-brønds pladeformat, hvilket lettede håndtering i både forsknings- og diagnostiske laboratorier. Det blev imidlertid tydeligt, at præanalytiske faktorer - såsom valg af blodopsamlingsrør, opbevaringsbetingelser og prøvehåndtering - har væsentlig indflydelse på resultaterne, hvilket understreger nødvendigheden af standardiserede protokoller.
Selvom venøst blod udgør den primære kilde til EV’er, har MMM påvist, at intakte EV’er også kan udvindes fra tørrede blodpletter (DBS). Denne metode muliggør prøvetagning uden for kliniske rammer samt forsendelse med almindelig post, hvilket gør EV-baseret screening mere praktisk og tilgængelig.
De nyeste metodologiske udviklinger inkluderer to-kolonnes detektion, som gør det muligt at måle flere biomarkører samtidigt, samt integration med Single Molecule Localization Microscopy (SMLM). Denne kombination gør det muligt ikke alene at kvantificere biomarkører med høj følsomhed, men også at opnå præcis rumlig lokalisering af EV’er baseret på deres overflademarkører, indhold, størrelse og morfologi.
Samlet set har feltet bevæget sig fra teknisk krævende analyser med store prøvekrav til mere skalerbare, følsomme og klinisk relevante metoder. Fremadrettet tegner EV’er sig således som en central brik i udviklingen af nye diagnostiske værktøjer og målrettede behandlinger.
Læs mere og download afhandlingen her.
Tid og sted
Forsvaret finder sted fredag den 3. oktober kl. 13-16 i Auditoriet på AAU Sund, Selma Lagerløfs Vej 249 / Hospitalsbyen 2-4, Indgang 7.
Bedømmelsesudvalg
- Svend Birkelund, Professor, Cand. Med., Ph.D., Dr.Med Department of Health Science and Technology, Aalborg University (formand)
- Edit Buzas, Professor, MD, Ph.D., Department of Genetics, Cell- and Immunobiology Semmelweis University, Hungary
- Edit Buzas, Professor, MD, Ph.D., Department of Genetics, Cell- and Immunobiology Semmelweis University, Hungary
- Aled Clayton, Professor, Ph.D., Tissue Microenvironment group School of Medicine Cardiff University, United Kingdom